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想必现在有很多小伙伴对于cas9基因敲除原理方面的知识都比较想要了解，那么今天小好小编就为大家收集了一些关于cas9基因敲除原理方面的知识分享给大家，希望大家会喜欢哦。

Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂，从而达到基因敲除的作用。

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造，将其连接在一起得到sgRNA（single guide RNA）。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力，但因为结构被简化更方便研究者广泛使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行操作。

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